DAF-FM Diacetate（DAF-FM二乙酸酯）

一氧化氮熒光探針/NO熒光探針

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基本介紹：

DAF-FM Diacetate（DAF-FM 雙乙酸鹽）是一種用于對細胞中的低濃度氧化亞氮進行定量的重要試劑。 在細胞內，非特異性酯酶可切割乙酸基。 生成的 DAF-FM 在與 NO 反應形成能發出熒光的苯并三氮唑之前，幾乎沒有熒光。495/515 nm 分別為最大激發/發射波長，因此可使用檢測熒光素的任何儀器來檢測 DAF-FM。

反應流程：

產品特性

1）  CAS NO：254109-22-3

2）   化學名：3',6'-bis(acetyloxy)-4-amino-2',7'-difluoro-5-(methylamino)-spiro[isobenzofuran-1(3H),9'-[9H] xanthen]-3-one

3）   英文同義名：DAF-FM Diacetate; 4-Amino-5-Methylamino-2',7'-Difluorofluorescein Diacetate; 3-Amino, 4- aminomethyl-2?,7?-difluorofluorescein Diacetate; Diaminofluorescein-FM diacetate;

4）   中文同義名：DAF-FM二乙酸鹽；二氨基熒光素-FM二乙酸鹽；4-氨基-5-甲氨基-2',7'-二氟熒光素二乙酸鹽；3-氨基, 4-氨甲基-2?,7?-二氟熒光素二乙酸鹽；

5）   分子式：C25H18F2N2O7

6）   分子量：496.42

7）   外觀：無色-橙色/紅色固體

8）   熒光光譜：

染色示例（來自文章）

Ref 1.Ha G, De Torres F, Arouche N, Benzoubir N, Ferratge S, Hatem E, et al. (2019) GDF15 secreted by senescent endothelial cells improves vascular progenitor cell functions. PLoS ONE 14(5): e0216602. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0216602

Method.Assessment of nitric oxide production（評估一氧化氮的產生）

DAF-FM diacetate (D23844, Invitrogen) was used to quantify NO production.At 80% confluence, cells were treated for 16h with GDF15 (50 ng/mL) or LPS (100 ng/mL) then washed and incubated with 1 μM DAF-FM diacetate probe in EBM2 + 0.5% FBS for 1h at 37°C. After removing the supernatant, cells were incubated in fresh EGM2 medium for 5 min at 37°C, resuspended in 1X PBS + 0.5% BSA and fluorescence intensity at 530 nm was quantified using Accuri C6 cytometer (BD Biosciences).

Fig 3. GDF15 improves AB-ECFC functions.(f) Intracellular nitric oxide (NO) MFI analyzed by flow cytometry using DAF-FM-2A probes in NT, LPS- (100 ng/mL) and GDF15- (50 ng/mL) treated AB-ECFCs (n = 8).

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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